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分子診斷所應(yīng)用到的分子生物學(xué)技術(shù)主要包括,聚合鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR),熒光定量PCR(qPCR),DNA測序(DNA Sequencing),熒光原位雜交(FISH),DNA印記技術(shù)(DNA Blotting),單核酸多態(tài)性(SNP)和基因芯片(Gene Chip)等技術(shù)。這些技術(shù)的操作都離不開一個重要的物質(zhì) – 核酸(DNA和RNA)。而由于日常檢測中要處理大量的不同來源的核酸以及核酸本身難以降解的特性,核酸污染是困擾絕大多實驗室的一個難題。微量的核酸污染會產(chǎn)生假陽性的檢測結(jié)果,這樣會對病人造成誤診,耽誤病情。如任由此情況發(fā)展,會形成氣溶膠污染而擴(kuò)散,會導(dǎo)致整個實驗室的污染,嚴(yán)重的會關(guān)閉實驗室,如無備用實驗室,會造成更大的損失。
在與核酸污染長期抗?fàn)幹?,人們也總結(jié)出了一些預(yù)防和清除核酸污染的方法。對于預(yù)防,實驗人員一定要不斷改進(jìn)并嚴(yán)格遵循實驗室操作流程,對實驗室不同操作進(jìn)行區(qū)域劃分,分裝試劑,定期對實驗儀器進(jìn)行滅菌,實驗室適當(dāng)通風(fēng),養(yǎng)成實驗中進(jìn)行陰陽對照的好習(xí)慣。當(dāng)污染已經(jīng)出現(xiàn),傳統(tǒng)的清除方法包括對可疑器用稀酸進(jìn)行擦拭或浸泡,紫外線照射,對反應(yīng)液用DNaseⅠ或內(nèi)切酶進(jìn)行處理等方法。這些方法對一些微量污染會有一定效果,但對污染效果不是很理想,而且紫外線照射會對人體造成一定的危害。近些年來,一些生物試劑公司專門開發(fā)研制出一些檢測清除核酸污染的試劑,這些試劑具有對人體無害,操作簡單,省時等特點,其中一些試劑只需噴灑在污染去經(jīng)過一段時間的反應(yīng),擦除后便可清除污染。但這些產(chǎn)品還是相對傳統(tǒng)方法花費(fèi)略高。
總之,對于核酸污染大家一定要給予足夠的重視,提前預(yù)防,不要等到污染已經(jīng)出現(xiàn)才想辦法清除,經(jīng)常在實驗室中配備清除污染的試劑,發(fā)現(xiàn)污染可馬上進(jìn)行處理,相信這樣核酸污染將不再是讓眾多實驗人員頭疼的問題。
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